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https://opendata.uni-halle.de//handle/497920112/159923
2024-03-29T06:16:41ZInteraktion zweier Signalwege in Granulosazellen - Wechselwirkung des Arylhydrocarbon-Rezeptors (AhR) und der Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Rezeptoren (PPAR) in der humanen Granulosazelllinie KGN
https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/8605
Title: Interaktion zweier Signalwege in Granulosazellen - Wechselwirkung des Arylhydrocarbon-Rezeptors (AhR) und der Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Rezeptoren (PPAR) in der humanen Granulosazelllinie KGN
Author(s): Jann, Johann-Christoph
Abstract: Umweltkontaminanten vermitteln über Transkriptionsfaktoren wie den Arylhydrocarbon Rezeptor (AhR) und die Peroxisome Proliferator-aktivierten Rezeptoren (PPAR) negative Einflüssen auf das reproduktive System. Ziel dieser Arbeit war es den Einfluss von Tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD, ein AhRLigand) und Di-ethylhexyl-phthalat (DEHP, ein PPAR Ligand), auf die Gonadotropin Sensitivität und Estrogensynthese in der humanen Granulosazelllinie KGN zu untersuchen. MEHP, der aktive Ligand von DEHP akkumuliert in KGN Zellen, was die Metabolisierung von DEHP belegt. Eine funktionelle Signalkaskade der PPARs wurde durch Rosiglitazon und Bezafibrat gezeigt. KGN Zellen wurden mit TCDD, DEHP oder beidem exponiert und mittels ELISA, qRT-PCR und Western Blot analysiert. Die Exposition mit TCDD, DEHP und dem Mix reduzierte die Estradiolsynthese und die Expression des FSH-R, DEHP jedoch erhöhte die Expression die LH-R. Diese Untersuchungen zeigen, dass Endokrine Disruptoren direkt über die Aktivierung des AhR, aber auch über Transaktivierung der PPAR die Genexpression mit weitreichenden Konsequenzen für Granulosazellfunktion verändern können.; Environmental contaminants binding to transcription factors, such as the aryl hydrocarbon receptor (AhR) and the peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs), contribute to adverse effects on the reproductive system. The aim of the study was to investigate the impact of tetrachlorodibenzo-p-dioxin(TCDD, anAhRligand) and di-ethylhexyl phthalate (DEHP, a PPARligand), on gonadotrophin sensitivity and estrogen synthesis in the human granulosa cell line KGN. Accumulation of the active metabolite MEHP demonstrates DEHP metabolism in KGN cells. A functional PPAR cascade was confirmed using rosiglitazone and bezafibrate. KGN were exposed to TCDD, DEHP or a mix of both and analysed by ELISA, qRT–PCR and western blot. Exposure decreased estradiol synthesis (TCDD, DEHP, mix) and reduced the expression of aromatase and FSH-R, but LH-R expression was increased by DEHP. This demonstrates that endocrine disrupting chemicals may act by direct activation of AhR or by transactivation via PPAR inducing subsequent transcriptional changes with long lasting effects on granulosa cell function.2016-01-01T00:00:00ZWirksamkeit verschiedener targeted drugs in Keimzelltumorzelllinien mit unterschiedlichem Differenzierungsgrad und differenzieller Cisplatinsensitivität
https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/8495
Title: Wirksamkeit verschiedener targeted drugs in Keimzelltumorzelllinien mit unterschiedlichem Differenzierungsgrad und differenzieller Cisplatinsensitivität
Author(s): Schaffrath, Judith
Abstract: Das Ziel der Arbeit war es, die Wirksamkeit verschiedener targeted drugs in testikulären Keimzelltumorzelllinien mit unterschiedlicher Cisplatinsensitivität zu untersuchen. Die in vitro Aktivität der Kinaseinhibitoren RAD001, AEE788 und AEW541 wurde in Cisplatin-sensitiven und -resistenten Keimzelltumorzelllinien untersucht. Dabei zeigten die Substanzen in allen Zelllinien zytotoxische Aktivität unabhängig von der Cisplatinsensitivität, die Kombination aus Cisplatin und den Kinaseinhibitoren zeigte additive und antagonistische Effekte. Zur Evaluation der Aktivität der Kinaseinhibitoren wurde die Expression und Phosphorylierung der Zielproteine vor und nach Exposition gegenüber den Substanzen im Western Blot untersucht. Während die Zelllinien Unterschiede in Expression und Phosphorylierung der untersuchten Proteine zeigten, konnte keine Korrelation zwischen Proteinexpression und -phosphorylierung und der Wirksamkeit der Kinaseinhibitoren nachgewiesen werden.; The aim of this study was to analyze the efficacy of targeted drugs in testicular germ cell cancer (GCT) cell lines with differential cisplatin sensitivity. The in vitro activity of kinase inhibitors RAD001, AEE788 and AEW541 was investigated in cisplatin sensitive and resistant GCT cell lines. The agents significantly inhibited proliferation in both cisplatin sensitive and resistant cell lines. The combination of cisplatin and the kinase inhibitors showed both additive and antagonistic effects in the studied cell lines. To evaluate the activity of the kinase inhibitors, western blot analysis of both the targeted receptors and their phosphorylated state was performed both before and after exposure to each substance. While the examined cell lines showed different expression profiles of the targeted receptors, there was no correlation between their expression and phosphorylation and the effectiveness of the agents.2016-01-01T00:00:00ZEinfluss des Weichmachers Di(2-ethylhexyl)phthalat auf die Adipogenese einer humanen Präadipozytenlinie
https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/8484
Title: Einfluss des Weichmachers Di(2-ethylhexyl)phthalat auf die Adipogenese einer humanen Präadipozytenlinie
Author(s): Hunger, Luise
Abstract: Der Weichmacher Di(2-ethylhexyl)phthalat (DEHP) steht unter Verdacht, obesogen auf den Menschen zu wirken. Ziel der Studie ist es, das obesogene Potenzial von DEHP in humaner Zellkultur zu untersuchen. Zellen der humanen Präadipozytenlinie Simpson-Golabi-Behmel-Syndrom (SGBS) wurden über 14 Tage zu reifen Adipozyten differenziert und während der Induktionsphase mit DEHP in umweltrelevanter Konzentration von 50 μg/ml exponiert. Die Hydrolyse von DEHP zu Mono(2-ethylhexyl)phthalat (MEHP) wurde mit HPLC-Massenspektrometrie nachgewiesen, die Dysregulation der Adiponektinsignalkaskade mit qRT-PCR, Western-Blot und ELISA analysiert, die Frage einer DEHP-induzierten Hypertrophie oder Hyperplasie mit FACS beantwortet und die intrazelluläre Lage von Perilipin und GLUT4 mit Immunfluoreszenz ermittelt. Die Gene Adiponektin, AMPK und ACACB waren an Tag 4 dysreguliert, die Proteinsynthese und -sekretion von LEPTIN im Gegensatz zu ADIPONEKTIN langfristig erhöht, und die Fetteinlagerung unter DEHP an Tag 8 signifikant erhöht. Diese Ergebnisse zeigen, dass DEHP ein obesogenes Potenzial auf SGBS-Zellen hat.; The plasticizer di-2-ethylhexyl phthalate (DEHP) is suspected to act as an obesogen on human beings. Aim of this study is to examine the obesogen potential of DEHP in human cell culture. Cells of the human preadipocyte cell line Simpson-Golabi-Behmel syndrome (SGBS) were differentiated to mature adipocytes for 14 days and were exposed to DEHP in an environmentally relevant concentration of 50 μg/ml. The hydrolysis of DEHP to its metabolite monoethylhexyl phthalate (MEHP) was proven by use of HPLC-mass spectrometry. The dysregulation of the adiponectin signalling cascade was analysed with qRT-PCR, Western-Blot and ELISA. The question whether DEHP induces hypertrophy or hyperplasia was answered with FACS and the intracellular locations of perilipin and GLUT4 were detected by use of immunofluorescence. QRT-PCR showed a dysregulation of adiponectin, AMPK and ACACB at day 4. ELISAs of day 14 extracellular medium revealed a long-term elevated protein synthesis and secretion of LEPTIN, but not of ADIPONECTIN. Day 8 FACS analysis resulted in a DEHP-induced elevated fat storage. These findings show that DEHP has an obesogen potential on human SGBS cells.2015-01-01T00:00:00ZBeeinflussung der Herzregeneration im Mausmodell durch Inhibierung von p53-abhängigen Signalkaskaden
https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/8453
Title: Beeinflussung der Herzregeneration im Mausmodell durch Inhibierung von p53-abhängigen Signalkaskaden
Author(s): Greye, Katharina
Abstract: In dieser Arbeit sollen in einem in-vivo-Experiment an adulten Mäusen die Effekte des synthetischen p53-Hemmers Pifithrin-α (PFT-α) auf das Postinfarkt-Remodeling und sein Einfluss auf die Apoptose und den Zellzyklus der Zellen des Herzmuskelgewebes nach einem Myokardinfarkt genauer untersucht werden. Dazu werden durch einen operativen Verschluss der linken Herzkranzarterie Myokardinfarkte induziert, und im Anschluss wird PFT-α über 6d intraperitoneal injiziert. Die Untersuchungen zeigen im Beobachtungszeitraum signifikant geringere Überlebensraten der mit PFT-α in einer Dosierung von 4,4 μg/g behandelten Versuchstiere, wobei Herzrupturen die Haupttodesursache darstellen. Die Gabe von PFT-α verschlechtert außerdem die Herzfunktion und führt zu einer signifikanten Zunahme der Infarktausdehnung. Zudem verringert PFT-α die Replikationsraten der Nicht-Muskelzellen im Infarktgebiet. Zusammenfassend kann festgestellt werden, dass die Gabe von PFT-α nach akutem Myokardinfakt im Mausmodell zu einer Destabilisierung der sich entwickelnden Narbe und damit dem vermehrten Auftreten von Herzrupturen führt.; This work uses an in-vivo experiment of adult mice to examine the effects of the p53 inhibitor pifithrin- α (PFT-α) on remodeling after myocardial infarction and its influence on apoptosis and cell cycle of heart tissue after myocardial infarction. For this purpose myocardial infarcts are generated by an operative ligation of left coronary artery followed by intraperitoneal injection of PFT-α over a period of 6 days. The experiments result in a significant reduction of survival rates of mice which get PFT-α in a high dose (4,4 μg/g), with myocardial rupture being the main cause of death. Furthermore, the administration of pifithrin-α deteriorates heart function and leads to a significant increase of infarct extension. PFT- reduces the replication rate of non-cardiomyocytes in the infarct area. In summary, in the mouse model the application of PFT- after acute myocardial infarction leads to a destabilization of infarction scar followed by an increased rate of cardial rupture.2015-01-01T00:00:00Z