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Please use this identifier to cite or link to this item: http://dx.doi.org/10.25673/181
Title: Prokaryotische Expression, in vitro-Faltung und Rekonstitution des Neuropeptid Y-Rezeptors Typ 2 für NMR-Strukturanalysen
Author(s): Schmidt, Peter
Advisor(s): Rudolph, Rainer, Prof. Dr.
Huster, Daniel, Prof. Dr.
Gawrisch, Klaus, PD Dr.
Granting Institution: Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg
Issue Date: 2009
Extent: Online-Ressource (110 Bl. = 2,76 mb)
Type: Hochschulschrift
Exam Date: 25.11.2009
Language: German
Publisher: Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt
URN: urn:nbn:de:gbv:3:4-3036
Subjects: Online-Publikation
Hochschulschrift
Abstract: G-Protein gekoppelte Rezeptoren (GPCRs) sind essentiell in einer Vielzahl von Signal-übertragungswegen und repräsentieren daher ein lohnendes Ziel für pharmazeutische Studien. Für strukturbasierte Medikamentenentwicklung sind Daten zur Struktur und Dynamik von GPCRs, wie sie die NMR-Spektroskopie liefern kann, Grundvoraussetzung. In dieser Arbeit wurden Protokolle zur prokaryotischen Expression, zur Reinigung, zur in vitro Faltung und zur Rekonstitution des Klasse A G-Protein gekoppelten Y-Rezeptors Typ 2 entwickelt, mit der Rezeptorproben in einer Qualität und Quantität hergestellt werden können, die Untersuchungen mittels der NMR-Spektroskopie ermöglichen. In der Expression wurden Ausbeuten von >15 mg hochreinen, 15N-markierten Rezeptoren/Liter Medium erreicht. Nach Reinigung und Faltung des GPCRs in einer Detergensumgebung konnte eine Liganden-affinität von 1,9 nM gezeigt werden. Die Stabilisierung der nativen Struktur in hoher Konzentration erfolgte in Phospholipidmembranen.
URI: https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/6787
http://dx.doi.org/10.25673/181
Open access: Open access publication
Appears in Collections:Biochemie

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