Generation of novel intracellular binding reagents based on the human γB-crystallin scaffold

Abstract

Im Rahmen der vorliegenden Dissertation wurde daher die Eignung der γB-Kristallin-Struktur für die Entwicklung von intrazellulären Bindeproteinen untersucht. Als Modell wurde das human Papillomavirus E7 Protein, welches bei der Entwicklung von Gebärmutterhalskrebs eine Rolle spielt, ausgewählt. In einem Phage-Display Selektionsprozess konnten erfolgreich anti-E7 Affilin Varianten mit Affinität zu E7 im nano- bis mikromolaren Bereich isoliert werden. Für anti-E7 Affilin Varianten, die in eukaryontischen Zellen transient produziert wurden, konnte eine signifikante und spezifische Inhibierung der Proliferation E7-positiver Zellen nachgewiesen werden. Die hier präsentierten Ergebnisse belegen damit erstmalig, dass Affilin Moleküle ihre Funktionalität und ihre Bindungseigenschaften auch im reduzierenden Medium des Zellinneren von eukaryontischen Zellen behalten. Sie sind daher für die Generierung neuartiger intrazellulär funktioneller Bindeproteine grundsätzlich geeignet.