Implementierung einer Festphasen Assay-basierenden Verträglichkeitsprobe zum Ausschluss Donor-spezifischer Antikörper für Nierentransplantatempfänger nach Konditionierung mit therapeutischen Antikörpern

Abstract

Antikörper, die gegen HLA-Merkmale von Organspendern gerichtet sind, stellen die Hauptursache hyperakuter und akuter Abstoßungsreaktionen dar. Zum Ausschluss sogenannter Donor-spezifischer HLA-Antikörper (DSA) galt bisher der Komplementabhängige Lymphozytotoxizitätstest (CDC) als Goldstandard. Dieser Test führt jedoch bei Patienten, die mit therapeutischen Antikörpern behandelt wurden, nicht zu validen Ergebnissen. Ziel der Arbeit war es, zu untersuchen, ob der ELISA-basierende Kreuztest (AMS- /AbCross-ELISA) in diesen Fällen artefaktfreie Ergebnisse liefert und somit eine geeignete Alternative darstellt. 27 Seren von Patienten unter Rituximab-Therapie und 4 Seren Basiliximab-behandelter Patienten wurden vergleichend mit beiden Testverfahren untersucht. Als Referenzmethode wurden virtuelle Kreuztests durchgeführt. Während der CDC in allen Fällen keine validen Ergebnisse erbrachte, konnten mittels des ELISA-Kreuztests DSA sicher ausgeschlossen, bzw. plausibel nachgewiesen werden.

Antibodies directed against HLA antigens of a given donor represent the most prominent cause for hyperacute or acute rejections. In order to select recipients without so-called donor-specific antibodies the complement-dependent cytotoxicity (CDC-) crossmatch is used as the standard procedure until now. However, this test does not lead to valid results in patients treated with therapeutic antibodies. The aim of the work was to investigate, whether the ELISA-based crossmatch (AMS- / AbCross- ELISA) provides artifact-free results in these cases and thus represents a suitable alternative. 27 sera from patients on rituximab therapy and 4 serums of basiliximab-treated patients were investigated for DSA using both tests. As a reference method virtual cross-matching was used. While the CDC did not give any valid results in all cases, the ELISA-based crossmatch could reliably exclude or plausibly demonstrate donor-specific antibodies.