Expression und Regulation von Dentinsialophosphoprotein und Maspin in dentalen Pulpastammzellen

Abstract

Ziel dieser Arbeit war es, die Expression von DSPP und Maspin und die ALP-Aktivität bei zwei Zellarten der dentalen Pulpa nach Stimulation mehrerer Signalkaskaden zu untersuchen. Aus extrahierten Zähnen wurden Zellen isoliert und in DPSC und DPC- sortiert. Die Zellen wurden über 24h, 48h und 72h stimuliert und die Expression von DSPP und Maspin untersucht. Nach 4d und 5d erfolgte die Messung der ALP-Aktivität. Die Stimulation mit PMA, EGF und b-FGF zeigte bei allen Zellen nach 24h eine verringerte DSPP-Expression. Dieser Effekt war nach 48h nicht mehr nachweisbar. Es konnte keine Expression von Maspin auf RNA- oder Proteinebene nachgewiesen werden. Die DPC- zeigten durch den hohen Anteil an differenzierten Zellen insgesamt eine höhere ALP-Aktivität, die durch die Stimulation nicht mehr beeinflusst wurde. Die ALP-Aktivität der DPSC stieg während des Versuches in allen Gruppen an. In Limitation eines in-vitro-Versuches lässt die RNA- und Proteinexpression auf eine Hemmung der DSPP-Expression durch PLCγ und eine Steigerung über MAPK schließen. Die hohe ALP-Aktivität nach der Stimulation der DPSC zeigt den höheren Differenzierungsgrad.

The aim of this study was to investigate the expression of DSPP and maspin and the ALP activity in dental pulp cells. Two different cell types were isolated from extracted teeth, DPSC and DPC-. The cells were stimulated for 24h, 48h and 72h and the expression of DSPP and maspin was measured. The ALP activity was evaluated after 4d and 5d. The stimulation with PMA, EGF and b-FGF shows a decreasing effect on the DSPP expression after 24h. After 48h this effect was no more verifiable. No expression of maspin at the RNA or protein level could be detected. Due to the high proportion of differentiated cells, the DPC- showed an overall higher ALP activity, this could not be influenced by stimulation. The ALP activity of the DPSC increased in all groups during the trial. In limitation of an in vitro experiment, the RNA and protein expression suggests an inhibition of DSPP expression by PLCγ and an increase via MAPK. The high ALP activity after DPSC stimulation shows the reached higher degree of differentiation.