Selection and characterization of Arabidopsis thaliana cohesin and condensin T-DNA insertion mutants

Abstract

Schwesterchromatidenkohäsion, Chromosomenkondensation, DNA-Reparatur, Rekombination und Transkription sind unentbehrliche Prozesse für alle Eukaryoten. SMC (Structural Maintenance of Chromosomes) Komplexe sind essentiell für diese Aufgaben. Die SMC-Komplexe Kohäsin und Kondensin wurden in Arabidopsis thaliana untersucht. T-DNA Insertionsmutanten für alle putativen Kohäsin- und Kondensingene wurden bezüglich des Habitus, der Fruchtbarkeit, mRNA Expression und der Anzahl der T-DNA Kopien analysiert. Die T-DNA Linien wurden mit einem Chromatin-markierenden Konstrukt (H2B-YFP) transformiert und in einem “life cell imaging” Versuch bezüglich des Auftretens von Störungen in mitotischen Teilungen und in der Interphase untersucht. Die Folge der Mutationen in einigen Kohäsingenen waren fehlerhafte Mitosen mit Anaphasebrücken. In Kondensin Mutanten wurde ebenfalls eine erhöhte Anzahl von Anaphasebrücken beobachtet. Kohäsine und Kondensine sind für den korrekten Ablauf der Mitose unentbehrlich.