Etablierung hormonaler Assays und Testung von Extrakten, Naturstoffen und synthetischen Verbindungen

Abstract

Der Androgenrezeptor (AR) und seine Signalwege spielen in einer Vielzahl von Erkrankungen eine wichtige Rolle. Um Verbindungen und Pflanzen- bzw. Pilzextrakte mit androgener oder antiandrogener Aktivität zu identifizieren wurde eine Screeningroute etabliert. Diese bestand aus einem Zellproliferationsassay mit LNCaP- und PC-3-Zellen, einem AR-Bindungsassay und einem Genexpressionsassay unter Verwendung von VCaP- und LNCaP-Zellen. 147 Verbindungen und 186 Fraktionen aus 23 Organismen wurden getestet. Die identifizierten sechs potentesten AR-Binder wurden auf ihre Bindungsaffinität an den anderen Steroidhormonrezeptoren getestet. Der stärkste AR-Binder (Ki = 10.8 nM) wirkt agonistisch und weist eine nichtspezifische AR-Bindung auf. Von den aktiven Fraktionen wurden die Cibotium barometz-Fraktionen für weiterführende Untersuchungen ausgewählt. Durch Genexpressionsanalyse konnte ein antiandrogenes Verhalten über eine Erniedrigung des PSA- und AR-mRNA-Spiegels gezeigt werden.