Untersuchungen zur Expression und Funktion Ewing-Sarkom-assoziierter Gene

Abstract

Da Ewing-Sarkome mit einer Langzeit-Überlebenswahrscheinlichkeit von etwa 70 % deutlich schlechter zu heilen sind, als die meisten anderen Krebserkrankungen im Kindesalter, sind die derzeitigen Behandlungsformen noch unbefriedigend und zu verbessern.Das Ziel lag in der weiteren Charakterisierung des Tumors, um neue Diagnosemarker und therapeutische Zielstrukturen zu identifizieren. Dabei stand initial das Gen Lipase I im Fokus der Untersuchungen. LIPI wurde bereits zuvor als stark überexprimiertes Gen im Ewing-Sarkom im Vergleich zu Normalgeweben mittels Mikroarrayanalyse nachgewiesen. Zunächst wurde LIPI als weiterer Marker, neben EWS-FLI1, zur Diagnose eines Ewing-Sarkoms evaluiert. Des Weiteren wurde eine differenzielle Genexpressionsanalyse des ebenfalls in Ewing-Sarkomen hoch exprimierten Gens RBM11 durchgeführt, um neue therapeutische Zielstrukturen zu identifizieren und ein besseres Verständnis der Signalkaskaden des Ewing-Sarkoms zu erlangen.Das Chemokin CXCL14 war aufgrund der besonders hohen Expression im Vergleich aller differenziell regulierten Gene von besonderem Interesse.

Ewing family tumours (EFT) are the second most frequent primary bone cancer arising in children and young adults. By microarray analyses our group identified about 38 genes that are up-regulated in EFT in comparison to normal tissue. One of these genes is the membrane-associated phospholipase A1 beta (LIPI). LIPI has been identified as Cancer Testis Antigen. LIPI is located on chromosome 21 in head to head orientation and might be co-regulated to another gene highly expressed in EFT, RNA Binding Motif (RBM11). Recently, some members of the RBM family have been shown to play an important role in apoptosis regulation. In order to analyse the function of RBM11 in EFT RBM11 expressionwasknocked down by using RBM11 specific siRNAs. Validated Data indicate that RBM11 regulates expression of several genes that are involved in tumour growth, metastasis or neuronal differentiation. One of these genes is CXCL14, a chemokine that inhibits growth of human tumour cells. Co-culture of Ewing-tumour cells and PBMC treated with the chemokine CXCL14 induced tumour cell death in a dose dependent manner. Concomitantly, CXCL14 induces expression of cytokines like INF-γ and TNF.