Der Einfluss des p0071 Proteins auf die Zellpolarität

Abstract

Für die Ausbildung der Zellpolarität sind u. a. Zell-Zell-Kontakte, der intrazelluläre Vesikeltransport und die Organisation des Zytoskeletts von Bedeutung. In den vergangenen Jahren konnte für p0071 eine Beteiligung an den aufgeführten Aspekten nachgewiesen werden, doch blieb der genaue Einfluss von p0071 auf die Zellpolarität bisher ungeklärt. Die vorliegende Arbeit belegt nun, dass p0071 einen Einfluss auf die Ausbildung der apikal-basolateralen Zellpolarität in Caco-2 Zellen besitzt. So verringert ein stabiler p0071 Knockdown in dieser Zelllinie die Membranlokalisation von Zellkontaktproteinen und damit die interzelluläre Adhäsion. Zudem ist die Lumenbildung in der 3D Zellkultivierung gestört und der Anteil an Zellen mit multipolaren mitotischen Spindeln erhöht. Es wurden auch vergleichende Studien zwischen p0071 und dem verwandten p120 Catenin durchgeführt, die zeigen, dass die stabilisierende Funktion von p120 auf die klassischen Cadherine nicht auf p0071 in murinen und humanen Keratinozyten übertragbar ist. Ein ebenfalls durchgeführter Yeast Two Hybrid Screen identifizierte Komponenten des COPII-Komplexes als putative Interaktionspartner für den C-Terminus von p0071.

For the formation of cell polarity are among others cell-cell contacts, the intracellular vesicle transport and the organization of the cytoskeleton important. In the last years it was found that p0071 plays a role within the mentioned aspects, however the exact influence of p0071 on cell polarity remained elusive. The present work shows now that p0071 has an influence on the formation of the apical-basolateral cell polarity in Caco-2 cells. A stable p0071 knockdown in this cell line reduces the membrane localization of cell contact proteins and the intercellular adhesion. In addition, 3D cell culture experiments revealed a disturbance in lumen formation as well as an increase of cells with multipolar mitotic spindles. There were also carried out comparative studies between p0071 and the related p120 catenin, showing that the stabilizing function of p120 on the classic cadherins is not transferable to p0071 in murine and human keratinocytes. Moreover, a performed yeast two hybrid screen identified components of the COPII complex as putative interaction partners for the C-terminus of p0071.