Massenspektrometrische Untersuchungen des Sekretoms nicht-kleinzelliger Lungenkrebszellen

Abstract

Lungenkrebs steht mit 353.500 Todesfällen pro Jahr an der Spitze der Krebsstatistiken. In ca. 85% der Fälle handelt es sich um nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC). In dieser Arbeit wurden eingehende massenspektrometrische Analysen der Sekretome zweier verschiedener NSCLC-Zelllinien (PC9, erlotinibsensitiv und PC9ER, erlotinibresistent) durchgeführt und mittels SILAC-Ansatz quantitativ miteinander verglichen. Nicht nur bei der Krebsentstehung, sondern auch bei der Entwicklung von Resistenzen gegen Apoptose- und Nekrose-induzierende Therapien, spielen Tumor-Wirtsinteraktionen eine wichtige Rolle. Diese Interaktionen werden durch therapeutische Eingriffe modifiziert und verändern sich wesentlich, wenn Tumorzellen Resistenzen gegen spezifische Therapeutika entwickeln. Ziel der angewandten Proteomikansätze war daher nicht nur die Identifizierung unterschiedlich regulierter Proteine. Vielmehr sollten auch die Interaktionen der identifizierten Proteine charakterisiert werden.

Lung cancer is the most common cancer fatality in Europe (353,500 deaths/year) with non-small cell lung cancer (NSCLC) comprising 85% of all casualties. In this study, in-depth mass spectrometric analyses of NSCLC cell secretomes were conducted. For a quantitative comparison of proteins secreted by two different NSCLC cell lines (PC9, erlotinib-sensitive and PC9ER, erlotinib-resistant) a stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC) approach was applied. Tumor-host interactions play a major role in carcinogenesis, but also in resistance to apoptosis- and necrosis-inducing treatment. These interactions are modified by therapeutic interventions and change substantially when tumor cells become resistant to a therapeutic agent. The aim of the used proteomic approaches was to go beyond a mere identification of proteins that are differentially regulated between PC9 and PC9ER cells. The intention was to additionally characterize the interactions of these proteins.