Expression und Charakterisierung von Ligand Receptor Interacting Factor 1 (LRIF1)

Abstract

Die GNE-Myopathie ist eine seltene, weltweit auftretende Myopathie, die durch eine Mutation der UDP-N-Acetylglucosamin 2-Epimerase/N-Acetylmannosamin-Kinase (GNE) verursacht wird. Im Vorfeld dieser Dissertation wurde der Ligand Receptor Interacting Factor 1 (LRIF1) als potentieller Interaktionspartner der GNE gefunden. Die Untersuchung einer möglichen Interaktion war Ziel der Arbeit. Expressionsanalysen zeigten LRIF1-mRNA-Transkripte in allen untersuchten humanen Geweben. Western-Blot-Analysen fanden LRIF1 in den humanen Tumorzelllinien CHO, HeLa, HL60, MeWo und SH-SY5. Lokalisationsuntersuchungen fanden LRIF1 ausschließlich nukleär und GNE nur im Zytosol. Kolokalisationsstudien mit GNE zeigten, dass die Überexpression des einen Proteins keinen Einfluss auf die Lokalisation des Anderen hat. Von einer Interaktion kann somit nicht ausgegangen werden und eine Beteiligung von LRIF1 an der Pathogenese der GNE-Myopathie ist unwahrscheinlich.

GNE myopathy is a very rare, worldwide occurring myopathy, which is caused by a mutation of UDP-N-acetylglucosamine 2-epimerase / N-acetylmannosamine kinase (GNE). In advance, the ligand Receptor Interacting Factor 1 (LRIF1) was found to be a potential interaction partner of the GNE. This possible interaction was the object of the present study. Expression analyzes revealed LRIF1 mRNA transcripts in all investigated human tissues. Western blot analyzes were able to show LRIF1 in the human tumor cell lines CHO, HeLa, HL60, MeWo and SH-SY5. Localization studies found LRIF1 exclusively nuclear and GNE only in the cytosol. Colocalization studies with GNE showed that overexpression of one protein has no influence on the localization of the other. As a result, no interaction can be assumed and involvement of LRIF1 in the pathogenesis of GNE myopathy is unlikely.