Strukturelle Untersuchungen der Wechselwirkungen zwischen DltA und DltC

Abstract

Die D-Alanylierung der Teichonsäuren in der Zellwand hilft gram-positiven Bakterien mit bestimmten Umweltbedingungen, z.B. Veränderungen des pH-Wertes besser umzugehen und erhöht die Resistenz gegen Antibiotika. Von den für die D Alanylierung verantwortlichen Proteinen liegen die Proteine DltA und DltC in löslicher Form im Zellplasma vor. DltA aktiviert D-Alanin mittels Adenylierung und überträgt es auf DltC. DltC besitzt dazu den Kofaktor Phosphopantethein an den D-Alanin kovalent gebunden wird. Die Interaktion von DltC und DltA und die einzelnen Proteine wurden in dieser Arbeit untersucht. Von DltC konnten mehrere Kristallstrukturen gelöst werden, die zeigen, dass der Kofaktor keinen Einfluss auf die Struktur von DltC hat. Diese Erkenntnis konnte mittels NMR-Spektren bestätigt werden. Durch NMR-Titration konnten Bindungsregionen von DltC, die mit DltA interagieren, identifiziert werden. Die Kristallstruktur eines DltA-DltC-Komplexes bestätigt die Interaktion über die mit NMR gefundenen Bereiche von DltC. Des Weiteren zeigt die Komplexstruktur eine bisher unbekannte Art der Interaktion zwischen DltA und DltC, bei der DltC nicht mit D-Alanin beladen werden kann.