Genexpressionsanalysen der Matrix-Metalloproteinasen 9, 12 und 13 in refluxexponierten Miniorgankulturen

Abstract

Laryngopharyngealer Reflux wird als ein Risikofaktor für verschiedene Krankheitsbilder des oberen Aerodigestivtraktes gemutmaßt. Ausgehend von der Tatsache, dass Matrix-Metalloproteinasen an Differenzierungsprozessen humanen Gewebes beteiligt sind, wurde in der vorliegenden Studie ein Modellsystem etabliert zur Untersuchung refluxassoziierter Expressionsmuster von MMP 9, 12 und 13. Nach Conchotomie wurden Nasenmuscheln von 19 Patienten standardisiert 7 Tage in Form von Miniorganen kultiviert und anschließend mit Magensaft der pH-Werte 4,5 und 5,5 eine Stunde inkubiert. Es erfolgte die Isolierung der mRNA mit darauffolgender cDNA-Synthese und Amplifikation mittels PCR. Nach Konditionierung der Mukosa mit Magensaft zeigten MMP 9, 12 und 13 im Gegensatz zur mitgeführten „Negativprobe“ keine signifikanten Expressionsveränderungen. Signifikante Unterschiede zeigten innerhalb der „Negativproben“ MMP 9 bei Patienten mit dem anamnestisch ermittelten Nikotinabusus sowie MMP 12 bei Patienten mit vorbestehenden Refluxbeschwerden.

Laryngopharyngeal reflux is supposed to be a risk factor for different clinical pictures concerning the upper aerodigestive tract. Based on the fact that matrix metalloproteinases are part of differentiation of human tissue there was established a model to investigate reflux associated gene expression of MMP 9, 12 and 13. After conchotomy the conchae nasales inferiores of 19 patients were cultivated standardized for 7 days in the form of mini organ cultures, subsequently one hour incubated with gastric juice of pH-value 4.5 and 5.5, followed by the isolation of mRNA, the synthesis of cDNA and the amplification through PCR. After conditioning the mucosa by gastric juice MMP 9, 12 and 13 didn´t show significant differences in gene expression in contradistinction to the probe of the control. But there were shown significant differences in MMP 9 expression within patients with nicotine dependence and MMP 12 expression within patients with pre-existing reflux symptoms.