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http://dx.doi.org/10.25673/1645
Title: | Design und Einsatz von Enzymen zur Bekämpfung von Biofilmen |
Author(s): | Hildebrandt, Uwe |
Referee(s): | Pietzsch, Markus, Prof. Dr. Groth, Thomas, Prof. Dr. Hausmann, Rudolf, Prof. Dr. |
Granting Institution: | Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg |
Issue Date: | 2015 |
Extent: | 1 Online-Ressource (177 Blatt = 3,68 MB) |
Type: | Hochschulschrift |
Type: | PhDThesis |
Exam Date: | 2015-12-08 |
Language: | German |
Publisher: | Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt |
URN: | urn:nbn:de:gbv:3:4-16319 |
Subjects: | Online-Publikation Hochschulschrift |
Abstract: | Proteinase K und Micrococcal Nuklease R wurden rekombinant produziert und genetisch modifiziert, um eine gerichtete Immobilisierung zu ermöglichen. Als Produktionsorganismus für die Micrococcal nuklease R wurde Escherichia coli BL21Gold (DE3) und für die Proteinase K Pichia pastoris X33 verwendet. Die Enzyme wurden enzymatisch aktiv auf poröse und planare Oberflächen wahlweise mit genetisch inseriertem Multi-Histidin-Tag oder über Cysteine immobilisiert. Im Fall der Nuklease konnten enzymatisch aktive Cysteinsubstitutions Mutanten erzeugt werden. Anschließend wurden bioaktive Polypropylenoberflächen auf die Biofilmformation mit Pseudomonas fluorescens untersucht. Bei mit Proteinase K beschichteten Polypropylenfolien konnte ein verminderter bakterieller Bedeckungsgrad von bis zu 25 % abhängig von der Oberflächenbehandlung nachgewiesen werden. Auf Micrococcal Nuklease R-modifizierten Folien stieg im Gegensatz der bakterielle Bedeckungsgrad signifikant an. Proteinase K and micrococcal nuclease R was recombinant produced and genetically modified, to enable site-directed immobilization. The production organism used for micrococcal nuclease R was Escherichia coli BL21Gold (DE3) and for Proteinase K Pichia pastoris X33. All enzymes have been active immobilized on porous and planar surfaces either with genetically introduced multi-histidin-tag or cycteine insertions. In case of nuclease enzymatic active cysteine-substitution mutants was produced. Finally bioactive coated polypropylene surfaces were investigated in biofilm formation by Pseudomonas fluorescens cells. Up to 25 % pseudomonas coverage reduction was observed when Proteinase K was immobilized on polypropylene films dependent on surface treatment. For films coated with micrococcal nuclease R the bacterial coverage has increased significantly. |
URI: | https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/8416 http://dx.doi.org/10.25673/1645 |
Open Access: | ![]() |
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Appears in Collections: | Biochemie |
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