Analysen zur Transkriptionsregulation und zum trans-Spleißen am mod(mdg4)-Locus von Drosophila melanogaster

Abstract

mod(mdg4) ist ein komplexer Genlocus in Drosophila melanogaster, der >30 Chromatinproteine codiert. Die Verteilung seiner Exons auf beiden DNA-Strängen macht mod(mdg4) zum derzeit prominentesten Beispiel für alternatives trans-Spleißen. Der erste Teil der Arbeit beschreibt die Identifizierung von intragenischen Promotoren, die den Locustranskriptionell regulieren, sowie die funktionelle Analyse von Isoformen anhand induzierter überlappender Deletionen innerhalb des Locus, die molekular charakterisiert wurden. Mehrere neue Mutationsphänotypen wurden entdeckt und die Isoformen, die für beschriebene Phänotypen verantwortlich sind, konnten eingegrenzt werden.Die neu identifizierten Funktionen von mod(mdg4)liegen unter anderem in der Telomererhaltungund der Regulierung von Retrotransposons. Der zweite Teil beschreibt Studien des trans-Spleißprozesses anhand von Transgenen des D. virilis-Homologen wie auch von induzierten chromosomalenRearrangements, denen ein Bruchpunkt in mod(mdg4) gemein ist. Es konnte nachgewiesen werden, daß sehr wahrscheinlich alle mod(mdg4)-mRNAs mittels trans-Spleißen synthetisiert werden und daß die räumliche Integrität des Locuskeine wesentliche Voraussetzung für dessen Funktion ist. Außerdem konnte ein in vivo-Testsystem für Effektoren des trans-Spleißens etabliert werden und zwei potentielle Effektoren identifiziert werden.