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Please use this identifier to cite or link to this item: http://dx.doi.org/10.25673/1245
Title: Etablierung der humanen Myt1 Kinase als Zielstruktur moderner Arzneistoffentwicklung - Beiträge zu Expression und Assayentwicklung
Author(s): Bäßler, Claudia
Advisor(s): Sippl, Wolfgang, Prof. Dr.
Rüttinger, Hans-Herrmann, Prof. Dr.
Jung, Manfred, Prof. Dr.
Granting Institution: Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg
Issue Date: 2011
Extent: Online-Ressource (XI, 180 S. = 11,36 mb)
Type: Hochschulschrift
Exam Date: 15.12.2011
Language: German
Publisher: Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt
URN: urn:nbn:de:gbv:3:4-6933
Subjects: Aktivitätsmessung
Kinasen
Pharmazeutische Technologie
Online-Publikation
Hochschulschrift
Abstract: In der vorliegenden Arbeit erfolgte die Entwicklung zweier Testsysteme zur Aktivitätsbestimmung der beiden Wee Kinasen, Myt1 und Wee1. Methode 1 basiert auf einer Trennung von Substrat und Produkt mittels Kapillarelektrophorese (CE) und anschließender Fluoreszenzdetektion. Die zweite Methode wird durch einen Fluoreszenzpolarisations (FP) Immunoassay gebildet. Als Substrat der Kinasen wurden synthetische CDC2-abgewandelte un- / phosphorylierte Peptide eingesetzt. Für die CE Methode erfolgte eine Markierung der Peptide mit dem Fluoreszenzmarker 4-Fluoro-7-sulfamoylbenzofurazan, für die FP Methode mit Fluorescein-5-maleimid. Ein weiterer Aspekt dieser Arbeit lag im biotechnologischen und biochemischen Bereich, der sowohl Upstream- als auch Downstream-Prozesse einschließt. Für eine Expression der Myt1 Kinase in E. coli wurden verschiedene Expressionsstämme und Vektoren eingesetzt. Die Aktivitätsbestimmung der gewonnenen Enzymlösungen erfolgte mit den entwickelten Methoden. Neben Enzympräparationen aus bakteriellen Expressionen wurden auch Myt1- und Wee1-Präparationen aus Insektenzellen getestet.
URI: https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/7517
http://dx.doi.org/10.25673/1245
Open access: Open access publication
Appears in Collections:Pharmakologie, Therapeutik

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