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Please use this identifier to cite or link to this item: http://dx.doi.org/10.25673/1645
Title: Design und Einsatz von Enzymen zur Bekämpfung von Biofilmen
Author(s): Hildebrandt, Uwe
Advisor(s): Pietzsch, Markus, Prof. Dr.
Groth, Thomas, Prof. Dr.
Hausmann, Rudolf, Prof. Dr.
Granting Institution: Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg
Issue Date: 2015
Extent: 1 Online-Ressource (177 Blatt = 3,68 MB)
Type: Hochschulschrift
Exam Date: 08.12.2015
Language: German
Publisher: Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt
URN: urn:nbn:de:gbv:3:4-16319
Subjects: Online-Publikation
Hochschulschrift
Abstract: Proteinase K und Micrococcal Nuklease R wurden rekombinant produziert und genetisch modifiziert, um eine gerichtete Immobilisierung zu ermöglichen. Als Produktionsorganismus für die Micrococcal nuklease R wurde Escherichia coli BL21Gold (DE3) und für die Proteinase K Pichia pastoris X33 verwendet. Die Enzyme wurden enzymatisch aktiv auf poröse und planare Oberflächen wahlweise mit genetisch inseriertem Multi-Histidin-Tag oder über Cysteine immobilisiert. Im Fall der Nuklease konnten enzymatisch aktive Cysteinsubstitutions Mutanten erzeugt werden. Anschließend wurden bioaktive Polypropylenoberflächen auf die Biofilmformation mit Pseudomonas fluorescens untersucht. Bei mit Proteinase K beschichteten Polypropylenfolien konnte ein verminderter bakterieller Bedeckungsgrad von bis zu 25 % abhängig von der Oberflächenbehandlung nachgewiesen werden. Auf Micrococcal Nuklease R-modifizierten Folien stieg im Gegensatz der bakterielle Bedeckungsgrad signifikant an.
Proteinase K and micrococcal nuclease R was recombinant produced and genetically modified, to enable site-directed immobilization. The production organism used for micrococcal nuclease R was Escherichia coli BL21Gold (DE3) and for Proteinase K Pichia pastoris X33. All enzymes have been active immobilized on porous and planar surfaces either with genetically introduced multi-histidin-tag or cycteine insertions. In case of nuclease enzymatic active cysteine-substitution mutants was produced. Finally bioactive coated polypropylene surfaces were investigated in biofilm formation by Pseudomonas fluorescens cells. Up to 25 % pseudomonas coverage reduction was observed when Proteinase K was immobilized on polypropylene films dependent on surface treatment. For films coated with micrococcal nuclease R the bacterial coverage has increased significantly.
URI: https://opendata.uni-halle.de//handle/1981185920/8416
http://dx.doi.org/10.25673/1645
Open access: Open access publication
Appears in Collections:Biochemie

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