Komplementfaktoren I und H der Ratte - Identifizierung der Primärstrukturen, Untersuchungen zur Expressionsregulation und ihre Isolierung bzw. rekombinante Herstellung für funktionelle in-vitro Studien

Abstract

Aufgrund der Beteiligung des Komplementsystems an der Pathogenese verschiedener Erkrankungen eröffneten rekombinant erzeugte bzw. aus Serum isolierte Faktoren I (FI) und H (FH) die Möglichkeit zu einer Modulation dieses potentiell autoaggressiven Systems. Initial wurde die cDNA beider Faktoren aus der Ratte kloniert und sequenziert. Untersuchungen zur Expression und Regulation beider Faktoren in und außerhalb der Leber zeigten gravierende Unterschiede und eine erheblich restriktivere Expression des FI. Während IFN-γ die FH-Expression heraufregulierte, erfolgte die FI-Regulation allein durch IL-6. Zusätzlich regulierte das Anaphylatoxin C5a in Kupffer-Zellen die FH-Expression direkt herauf. Funktionell aktive Fragmente des FH [FH(SCR1-4) und FH(SCR1-7)] wurden rekombinant generiert und ihre Aktivität im Vergleich zu dem aus Rattenserum isolierten FH (SCR1-20) und FI in einem Komplementhämolysetest in-vitro untersucht. Die molare Aktivität des über drei C3b-Bindungsstellen verfügenden FH(SCR1-20) lag etwa 3,8-fach über der Aktivität der jeweils nur eine C3b-Bindungsstelle tragenden FH(SCR1-4) und FH(SCR1-7) –Fragmente.